Intentum usum
Usus est ad detectionem Virus Monkeypoxorum in serum humanorum vel laesione exudato exemplorum utendo temporis reali PCR systemata.
Test Principium
Hoc productum est de specillo fluorescenti substructio Taqman® temporis reali-PCR primordium systematis.Imprimis primarii et explorationes ad detectionem generum F3L Monkeypoxorum Virorum destinantur.Internum imperium targeting humanum conservatum monitorem generum collectionem sample collectionem, sample tractantem ac realem tempus PCR processum ad vitandos eventus falsi-negativos.Ornamentum est ratio lyophilizata plene praemissa, quae includit materias deprehensio Monkeypox Viri necessarias: amplificationis acidum nucleicum enzyme, UDG enzyme, quiddam reactionis, peculiare primarium et specillum.
Components | sarcina | Ingredient |
Virus SimiaeLyophilized Premix | 8 habena PCR tube6 mantica | Primae, speculatoriae, dNTP/dUTP Mix, Mg2+, Taq DNA polymerase, UDG Enzyme |
MPV Positivum Imperium | 400 μL×1 tube | DNA sequentia continet target gene |
MPV Negative Imperium | 400 μL×1 tube | DNA sequentia, quae segmentum generum humanum continet |
SOLUTIO SOLUTIO | 1 mL×1 tube | Stabilizer |
Testimonium conformitatis | pars I | / |
1. SampleCollectio:Specimina in fistulas steriles colligendae secundum
cum vexillum technicae.
2. Reagent Praeparatio (Reagent Praeparatio Area)
Partes ornamenti eximito, eas ad cella temperamentum libra pro usu sto.
3. Specimen Processing (Specimen Processing Area)
3.1 Acidum nuclei extractionis
Commendatur ad exemplaria liquida 200μL sumenda, Imperium positivum et Imperium negativum pro acido nucleico extrahendi, secundum debita requisita et procedendi DNA viralis extraction kits.
3.2 Lyophilized pulveris solutionis et additionis templates
Monkeypox Virus Lyophilised praemittit iuxta numerum exemplorum.Unum specimen desiderat unum PER tubulum in quo pulveris Lyophilized praemixtum continet.Imperium negativum & imperium affirmativum duo exemplaria tractari debent.
(1) Adde 15μL Solutionem solvendam in quamlibet PCR fistulam lyophilisatam continentem premix, adde 5μL specimina extracta / Imperium Negative / Imperium positiuum in quamlibet PCR tubulum respective.
(2) PCR tubulas arcte conte, per tubulas RAPIO donec pulvis lyophilisatus penitus dissolvatur et misceatur, liquorem ad imum PCR tube collige ab instantaneo humili velocitate centrifugationem.
(3) Si usu communi reali-time PCR instrumenti detectionis, protinus pcr fistulas ad aream amplificationem transferes;si uti BTK-8 ad detectionem, necesse est ut sequentes operationes perficias: 10 μL liquorem e PCR tubi transferre ad doli reactionem putei BTK-8.Unus PCR tubus uni bene respondet in chip.Per operationem pipetting, curare ut fistulae 90 gradus verticales sint.Aerosol claustrum pipettae apicibus collocari debet in centro putei cum modica vi et desinere impellere pipettum cum primum calces attingit (ad vitandas bullas).Postquam puteis repleti sunt, extrahe reactionem spumae membranae ad omnes puteos tegendas et postea scalpellum ad amplificationem deprehendendi aream transfertur.
4. PCR amplificatio (Detection Area)
4.1 PCR fistulae/reactionis chip in piscinam reactionem pone et nomina cuiusque reactionis bene in ordine respondente pone.
4.2 Occasus detectionis fluorescens: (1) Monkeypox virus (FAM);(2) Imperium internum (CY5).
4,3 Curre hoc cycling protocol
Protocollum ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:
Vestigia | Temperature | Tempus | Cycles | |
1 | Pre-denaturation | 95℃ | 2 mins | 1 |
2 | Denaturation | 95℃ | 10 s | 45 |
Anneratio, extensio, fluorescens acquisitio | 60℃ | 30 s |
Protocollum BTK-VIII;
Vestigia | Temperature | Tempus | Cycles | |
1 | Pre-denaturation | 95℃ | 2 mins | 1 |
2 | Denaturation | 95℃ | 5 s | 45 |
Anneratio, extensio, fluorescens acquisitio | 60℃ | 14 s |
5. Proventus analysis (placere ad Instrumentum User Manual
Post reactionem, eventus automatice salvabuntur.Preme "Analyse" ad resolvere, et instrumentum automatice Ct valores cuiuslibet exempli in columna resultans interpretabitur.Negativa et positiva dicione his conformentur "6. Imperium Qualitas".
6. Regimen quālitātis
6.1 Imperium negativum: No Ct vel Ct>40 in FAM alveo, Ct≤40 in CY5 canali cum amplificatione normali curva.
6.2 Imperium positiuum: Ct≤35 in FAM alveum cum curva amplificatione normali, Ct≤40 in CY5 canali cum amplificatione normali curva.
6.3 Effectus validus est si omnia praedicta criteria occurrant.Alioquin effectus invalidus est.
Proventus Interpretatio
Proventus sequentes possibilis sunt:
Ct valorem FAM channel | Ct valorem CY5 channel | Interpretatio | |
1# | Non Ct vel Ct> 40 | ≤40 | Monkeypox virus negativum |
2# | ≤40 | Proventus | Monkeypox virum positivum |
3# | 40~45 | ≤40 | Re- test;si adhuc XL ~ XLV, fama quam I # |
4# | Non Ct vel Ct> 40 | Non Ct vel Ct> 40 | Irritum |
NOTA: Si invalidus effectus incidit, specimen iterum colligendum et probatum est.
Product Name | Cattus.No | Magnitudo | Specimen | Fasciae vita | Trans.& Sto.Temp. |
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit | B001P-01 | 48 probat/ornamentum | Serum/Lesion Exudate | XII Menses | -25~-15℃ |